Razlika med neposredno in posredno ELISA

encimski imunski test ( ELISA ) vključuje reakcijo protitelesa - encima kompleksa z antigenom ali protitelesa potekala nepremična na trdni površini . Po inkubaciji konjugirani encim z ustreznim substratom , seprodukt. Tvorbi produkta pomaga odkriti prisotnost antigena ali protitelesa in količine, ki jo predstavlja merilo za količino antigen - protitelo reakcijo , ki je nastal . Test ELISA se lahko izvede v dveh oblikah: neposredni in posredni . Testna Format

V neposredni test ELISA , ki jeprimarno protitelo potekala na stene mikrotitrski plošči . Ko se dodavzorec sumi, da vsebuje antigen , jeantigen - protitelo reakcija . Nato se dodaencimsko sekundarna protitelesa, ki je sposobna reagirati z antigenom . Če je prisoten v vzorcu antigen , veže na ta encimsko protitelesa . Ko se dodabrezbarvni substrat , čese barva ne razvije , pa kaže na prisotnost antigena . V posrednem ELISA , ki je antigen potekala na stenah mikrotitrski plošči . Ko se dodavzorec sumi, da vsebuje protitelesa , prideantigen - protitelo reakcija . Nato se dodaencimsko sekundarno protitelo sposobno reakcije z nevezanega regije protitelesa . Ko se dodasubstrat brezbarvna , vodi k razvoju barvo, čeuporabljeni vzorec vsebuje protitelesa .
Enostavnost Testiranje

širok razpon vrednosti sekundarnih protiteles so komercialno voljo . Poleg tega je mogoče ustvariti več primarnih protiteles v določene vrste in uporabljajo isti sekundarno protitelo za detekcijo . To narediposredno ELISA lahko izvedljiv . V neposredni ELISA , primarni protitelesa biti posebej pripravljeni reagirati s specifičnega antigena sumimo, da so v vzorcu . To omogočaneposreden ELISA neugodna v primerjavi s posrednim testom .
Hitrost Testiranje

Test neposredno ELISA je hitro v primerjavi s posrednim testu , ker je uporablja samo eno protitelo . Posredni test ELISA zahteva dodaten korak inkubacije z drugim protitelesom med preskusnim postopkom , ki povzroča zamudo pri pridobitvi rezultatov.
Občutljivost

Test ELISA je neposredna manj občutljiva kot posrednega obliki testa , ker obstaja veliko manjša ojačenje signala . Poleg tega lahko označevanje primarnega protitelesa z encimom zmanjševale njegovo immonoreactivity profil. V primeru posrednih ELISA , ki jeprimarno protitelo ni označeno in zato , da ohrani svojo immunoreactivity . Poleg tega so vsak primarni protitelo ima veliko epitopov , ki lahko poveže s sekundarnih protiteles , s tem se omogoči ojačitev signala , izboljšanju občutljivosti Postopek je . Vendar obstajamožnost, navzkrižne reakcije med antigenom in sekundarnih protiteles , ki vodi do napake v rezultatih . Obstaja ta možnost v neposredni metodi ELISA št.