Celice naj se zamrznejo , če so zdravi in aktivno raste z 90 -odstotno uspešnega a. Paziti je treba na ravnanje in visoke hitrosti centrifugiranja in živahna pipetiranje ali sesanjem se je treba izogibati , da se ohrani sposobnost preživetja in preprečuje poškodbe celic .
Cryoprotection
cryoprotection agent kot nadomestilo za znotrajcelično vodo . Sredstvo preprečuje ledenih kristalov in dehidracija , ki se pojavljajo v celicah . Sterilizirano glicerol in sterilizirano dimetilsulfoksida se pogosto uporabljajo v koncentraciji 5 odstotkov na 15 odstotkov ( volumen na volumen ) razredčene v obeh fetalni telečji serum ali medija rasti , odvisno od vrste celic.
Zamrzovanjem in skladiščenje
Celice v ledenem zmesi bi bilo treba počasi ohladili . Čeprogramabilni zamrzovalnik ni na voljo , se lahko kriofiol treba zaviti v tkivu ali namestiti v stiropor , ki lahko upočasnijo proces zamrzovanja . Celice je treba hraniti pri minus 80 stopinjah Celzija za 24 ur in nato prenese na tekočem dušiku za dolgoročno skladiščenje .
Odtaljevanja
Zamrznjene celice naj se hitro odmrznjeni . Lahko uporabimo v vodni kopeli pri 37 stopinjah Celzija . Paziti je treba s celicami , shranjene v tekočem dušiku , vendar pa, kot lahko tekoči dušik vnesite vial in lahko eksplodirajo, odmrznjena . Zamrzovanje Mešanico je treba razredčiti v medijih rasti. Celica preživetja , je treba oceniti z Trypan barve modro in celice gojijo kot običajno .
avtorske pravice Zdravje in Bolezni © https://sl.265health.com Vse pravice pridržane