Zdravje in Bolezni
  • Home
  • Alternativna medicina
  • shot shot
  • RAK
  • pogoji Obdelave
  • Dental Health
  • dietna prehrana
  • Družina Zdravje
  • Healthcare Industry
  • duševno zdravje
  • Varnost javno zdravje
  • ordinacijah Operations
  • | | Zdravje in Bolezni >  | Public Health Safety | Medical Research |
    Kaj je gelsko elektroforezo
    ? Gelska elektroforeza jemetoda ločevanja , identifikacija in opis lastnosti zmesi proteinov in nukleinskih kislin . Denaturirani vzorci selijo po uporabi električne energije v tanko, mokrega gela ponavadi narejeni iz poliakrilamidnim ali agaroze . Ločene vzorci se obarvajo , tako da jih je mogoče videti . Gel elektroforeza se uporablja v beljakovinami in raziskave nukleinskih kislin in v bolnišnicah ugotoviti nenavadne beljakovine ali vzorce DNK za diagnosticiranje bolezni, genetske napake in genskih odnose. Priprava vzorca

    Ko jedetergent , kot je natrijev dodecylsulfonate (SDS) dodamo beljakovine ali nukleinske kisline , se bodetergent povezujejo z in odprite ( denaturirani ) beljakovin in nukleinske kisline . Denaturacija proteinov omogoča lažje določiti njihovo molekulsko maso v elektroforezo . Znesek zahtevanega vzorca je običajno 100 do 500 nanogramov na vzorec pasu za proteine ​​in 5 do 100 ng na pasu za nukleinskih kislin v skupnem volumnu približno 25 let do 40 ul .
    Geli

    gel, navadno izdelan iz poliakrilamidnim ali agaroze , se lahko pripravi ali kupili ločiti te beljakovine . Gel jeveliko, kot želatino . To je predvsem voda , vendar je dovolj trden za ravnanje . Geli vsebuje pufer za nadzor pH . Gel je zelo tanka (1 do 2 mm ) in pravokotni . Ena stran izgleda kot glavnik z veliko manjkajočih zob . Vrzeli se imenujejo vodnjaki .
    Vzorec Nalaganje

    krajigel v komori s pufrom in nespremenjene beljakovine, se dodajo vodnjakov . Vzorci znanih molekulskih mas se dodajo zunaj vdolbinice . Geli so narejeni z različnimi količinami poliakrilamidnim . Zmanjšana močgel ( 4 odstotke ) je bolje za ločevanje molekul z visoko molekulsko maso , pri čemer jevišja trdnostjo gela ( 12 odstotkov ) za višje molekul molekulsko maso . Gradient gel spreminja jakost gela in ne more ločiti širok spekter beljakovin z izgubo neke resolucije .
    Elektromigraciji

    Z uporabo visoko napetostjo , denaturiranih proteinov pomikali proti dnu dobro. Večjamasa proteina ,počasneje se premika . Ko jeelektrika izklopljena, beljakovine nehajo premikati . Ena odstrani gel iz komore in kamenje v posodo z barvilom . Organske barve kot Coomaise modro ali kovinskih barvil, ki se uporabljajo za madeže proteinov , medtem ko so fluorescenčne barve , kot etidijev bromid uporablja za nukleinskih kislin .
    Analiza rezultatov

    S odvečnega madež , lahko vidimo, da mešanice loči v pasovih, ki so videti kot lestev . Položaj pasov je v primerjavi z razdaljo, ki jo standardi preselil za določanje molekulske mase vzorca v vsako skupino. Gel lahko dehidrirani z alkoholom in posušimo , tako da se lahko shrani . Intenzivnost barve pasu je nato mogoče meriti za določanje koncentracije beljakovin v vsakem pasu .
    Protokol razvoj

    Standardni protokoli so na voljo za delo z dobro znane beljakovin. Če jeraziskovalec zaposlen pri neznanem vzorcu , se lahkomoč gel , tip buffer , buffer pH , napetost , čas , in madež vse je treba optimizirati, da doseže najboljši ločevanje in signal.
    protokoli

    avtorske pravice Zdravje in Bolezni © http://sl.265health.com Vse pravice pridržane