Kako bi določili Protitelesa

ELISA ali- encimski imunski preizkus , je najpogostejši komercialno uporabljajo presejalni test za odkrivanje protiteles . Ta preizkus se uporablja za iskanje uporabo drog , nosečnosti, AIDS in hepatitis , med drugimi pogoji . Ta test je priljubljena zaradi enostavnosti uporabe in nizke stroške . Tisto, kar potrebujete
Serum vzorec
ELISA ploščo
antigene, ki konjugataprotitelo, ki se preskuša naprodaj encimsko protiteles ali sekundarnih protiteles
encimsko barvni indikator sprememb
papirnate brisače
Očala
Proste Prikaži več navodil

1

Put znan antigen na površini več vrtin .

Cover vsaki dobro s 50 mikrolitri IgG tekočine . Ne moti vrtine do 5 minut je minilo . Sperite vdolbinic s tekočo vodo . Ponovite postopek za izpiranje petkrat . Dotaknite se dobro na papirnato brisačo , da se posuši . Ne brišite vodnjake .
2

Dodaj vzorce telesne tekočine , imenovane serum , s ploščami . Ti vzorci telesne tekočine lahko vsebuje konjugat in konkurenčnimi rešitev vdolbinic. To bo veže kadar je prisotna protitelesa . Vzorce seruma je treba razredčiti tako, da bodo sprega na antigen , ki se uporablja v 1. koraku .
3

Dodaj beljakovin , kot kazein , da vodnjakov . To bo preprečilo druge proteine, ki se niso testirani za prijemanje ploščo.
4

Ploščo operite s spiranjem z vodo iz pipe vlije rahlo nad vodnjaki. Dalje, potrkajte na steno ploščo na papirnato brisačo , da odstranite odvečno vodo . Ponovite postopek pralni štiri večkrat. Ne brišite vodnjake . Dodamo protitelesa, ki se ujema z eno , ki se preskuša v vodnjake .
5

Ploščo operite s spiranjem z vodo iz pipe nežno prelijemo vodnjakov . Dalje, potrkajte na steno ploščo na papirnato brisačo , da odstranite odvečno vodo . Ne brišite vodnjake . Ponovite postopek pralni štiri večkrat. Ta izpiralni postopek odstraniti nobene antigen , ki ni vezana iz vrtine . V vdolbinice sedaj vsebujejo samo prisotnost protiteles proti komplekse , ki se testirali . Operite ploščo . To bo odstraniti vse nevezane konjugatov encimskih protitelesa .
6

Dodaj sekundarnih protiteles , ki se imenuje tudi anti- protitelesa , z vodnjaki. Ti bodo držijo protitelesi za odkrivanje . Sekundarne protiteles konjugiranih s kazalnikom spreminjanja barve , in na antigen , ki je dodan k že v 1. koraku .
7

Plošča umijte s spiranjem z vodo iz pipe previdno prelijemo vdolbinic. Dalje, potrkajte na steno ploščo na papirnato brisačo , da odstranite odvečno vodo . Ne brišite vodnjake . Ponovite postopek pralni štiri dodatne krat. To bo odstraniti dodatne encimsko protitelesa, ki niso vezani .
8

Nanesite povezan kazalnik sprememba barve encimsko ploščo.

To bo povzročilo vodnjake , ki imajo protitelesa počutje preskusi , da spremenite barvo .
9

Upoštevajte vdolbinico za spremembo barve, ki bodo kazali prisotnost protiteles v vzorcu telesne tekočine.