Tukaj je pregled uporabe ELISA za testiranje na HIV:
Antigenska prevleka:mikrotitrske plošče so prevlečene z antigeni, pridobljenimi iz proteinov HIV, kot je glikoprotein ovojnice (gp120, gp41), ali drugih virusnih komponent.
Dodajanje vzorca:Razredčeni testni serum ali vzorci plazme se dodajo v jamice plošče, prevlečene z antigenom.
Reakcija protitelo-antigen:Če so protitelesa proti virusu HIV prisotna v vzorcu, se bodo vezala na ustrezne antigene, prevlečene na ploščici. Tako nastane kompleks antigen-protitelo.
Korak pranja:Nevezane snovi, kot so odvečne komponente vzorca, se sperejo.
Na encim vezano sekundarno protitelo:Doda se encimsko vezano sekundarno protitelo, specifično za ujeta protitelesa HIV. To protitelo je konjugirano z encimom, kot je hrenova peroksidaza (HRP).
Dodatek substrata:doda se substrat, specifičen za encim. V prisotnosti HRP pride do kolorimetrične ali fluorescentne reakcije.
Razvoj barve:Po določenem inkubacijskem obdobju se substrat pretvori v obarvan ali fluorescenčen produkt, ki ga je mogoče zaznati in kvantificirati z uporabo čitalnika ELISA.
Interpretacija rezultatov:Optična gostota (OD) ali intenzivnost fluorescence se meri za oceno količine zajetih protiteles HIV v vzorcu. Pozitiven rezultat kaže na prisotnost protiteles HIV, kar kaže na možno okužbo s HIV. Za razlikovanje med pozitivnimi in negativnimi rezultati je določena mejna vrednost.
ELISA se pogosto uporablja pri presejanju in diagnostiki HIV, saj zagotavlja razmeroma preprosto, natančno in občutljivo metodo za odkrivanje protiteles proti HIV. Vendar je treba opozoriti, da lahko rezultati testa ELISA včasih zahtevajo dodatno potrditev z dodatnimi testi, kot sta Western blot ali testiranje virusne obremenitve, da se zagotovi točnost diagnoze.
Zdravje in Bolezni © https://sl.265health.com