TMRE protokol

tetramethylrhodamine etil ( TMRE ) je" počasen , lipofilne , kationskih fluorescentno reditribution barvilo ", uporabljen v oceni potencialnega Kit MitoPT ™ TMRE /TMRM mitohondrijske membrane , ki ga ImmunoChemistry Technologies, LLC proizvaja. Proces pomaga , da si ogledate transmembranski električni potencialni padec v celicah . Priprava testom Na

protokol je enostavno slediti , in traja približno 20 minut, da se obdelajo pri temperaturi 37 stopinj Celzija . V žive celice , ki se uporabljajo v testu lahko traja od nekaj ur in več dni za pripravo uporabo . Kontrolne celice lahko traja nekaj ur za pripravo , saj morajo biti nagnjen k temu, apoptoza .
Protocol Part 1

Kultura celice do optimalne gostote za apoptozo ali oksidativni stres indukcija, glede na vaše posebne indukcijsko protokola , vendar ne sme presegati 10 ( 6 ) celic /ml .
Protokol Part 2

naisti čas , kulturane povzroča populacija celic negativne kontrole (na isti gostoti kot inducirane prebivalstva .
Protokol 3. del

aktivirajo apoptozo ali namenoma depolarizira mitohondrije po želeni protokol .
Protokol 4. del

Pripravite 1X testom /Wash Buffer .
Protokol Deli 5 do 8

Pripravite 1 mm ali 0,2 mM MitoPT ™ TMRE /TMRM zalog . za protokol dela 6 , pripravi 1:100 redčenje 1 mm, ali 1:20 razredčitev 0,2 mM MitoPT ™ TMRE /TMRM rešitev za vozlanje v vzorcih celičnih kultur .

Protokola dela 7 , madež celice, ki uporabljajo končno koncentracijo 20-200 nm MitoPT ™ TMRE /TMRM rešitev.

Protokola dela 8 , analizira podatkov.