Protokol za DAPI Stain

DAPI stoji za kemijsko 4' - 6 - Diamidino - 2 - phenylindole , in se uporablja , da se obarva dvoverižno DNA . Spojina tvori modre fluorescentne komplekse z jedra celic in tako se uporablja pogosto , da se poudari strukturo celic. Vrsto in gostoto obarvanja tudi lahko identificira mrtve ali umirajoče celice. Priprava DAPI rešitev

rešitev DAPI treba najprej razredčiti na delovnem rešitev. Na primer, 10 mg produkta Invitrogen DAPI mešati z 2 ml deionizirane vode in potem dalje razredčili do 300 koncentraciji nano - molarne ( Navodila bodo prisotni na izdelku ) s fosfatnim pufrom (PBS ) .

pripravo vzorca

pritrditi vzorec , kot je primerno glede na vrsto vzorca , ki se preskuša na diapozitiv . Dodamo 300 ul delovne raztopine DAPI za vzorec in inkubiramo 04:59 minut . Drsnik sperite s PBS .
Analiziranje

Uporabite fluorescentni mikroskop , da pogled na vzorec , drsno nameščen. V DAPI obarvane jedra se lahko označijo z modro fluorescenco .