Protiteles Označevanje Postopki

postopki označevanja s protitelesi so tehnike, uporabljene v bioloških znanostih za odkrivanje prisotnosti specifičnih molekul . Ti postopki uporabljajo razmerja med antigenom in protitelesa . Antigeni lahko vsako molekulo, daimunski sistem prepozna . Protitelo v obliki črke Y protein, ki specifično prepozna posamezno antigen . Biologi uporabo vezne razmerje med protitelesom in antigenom , da lahko določi lokacijo posebne molekule v vzorcu . ELISA

ELISA ali encimski imunski test , jebiološki laboratorij tehnika se uporablja za ugotavljanje prisotnosti antigena ali protitelesa. To se pogosto uporablja v medicinski diagnostiki , da se ugotovi, ali je bilbolnik izpostavljen določeno vrsto okužbe .

Za izvedbo ELISA ,vzorec — vsebuje antigen obrestne — je zasidrana trdna podpora v posodo . Raztopino z dopolnilnimi protitelesa doda posodo , in se protitelo veže na antigen . Presežek protitelesa se ​​nato izpere , ostanejo le parov za antigen - protiteles vezan na jed. Te lahko predstavljamo z dodajanjem fluorescentno molekulo , ki se veže na protitelo, in oddaja vizualni signal , ki se nato lahko količinsko . Na ta način je mogoče posredno določiprisotnost in količino antigena obresti .
Western Blot

Western Blot jedrugačna vrsta tehnike uporabljajo za odkrivanje specifični beljakovin v vzorcu , in določiti njegovo velikost. Prvič, vzorčne proteini so razporejeni po velikosti na gelu z uporabo gelsko elektroforezo . Na tej točki , proteini niso vidni s prostim očesom . Znanstveniki potem prenos proteinov na membrano in dodamo raztopino , ki vsebuje protitelo za antigen, ki nas zanima. Po spiranju odvečno raztopino , seprotitelo veže na antigen, na membrani .

Dodajanjem sekundarnega protitelesa povzročaprvotna ali primarna , protitelo , da oddajajo svetlobo . Kvantificiranjem količino oddane svetlobe omogoča raziskovalcem za ugotavljanje prisotnosti antigena , njena velikost v primerjavi z drugimi proteini in njegove relativne koncentracije .
Imunohistokemija

Imunohistokemija je tehnika, ki omogoča raziskovalci za vizualizacijo lokacijo proteina v vzorcu tkiva . Majhne rezine vzorca pripravimo inprimarno protitelo , ki se veže na antigen, se doda . Presežek raztopino izpere pred raziskovalci dodati sekundarno protitelo . To protitelo veže na primarno protitelo antigen para in oddaja svetlobo , signalizacijski lokacijo zadevni antigen .

Znanstveniki uporabo mikroskopske za vizualizacijo , kjer jeantigen v celici . Več različnih protiteles , vsak specifični za določen protein , se lahko uporabi za določanje relativnega mesto več molekul v celici . Če je tocilj, ki so različnih barv sekundarna protitelesa, ki se uporablja za razlikovanje med različnimi molekulami interesa.
Pretočno citometrijo

fluorescence aktivira celično sortiranje — ali FACS — jevrsta pretočno citometrijo uporablja za ločevanje različnih vrst celic v raztopini . Vsak drugačen tip celic je " označili " z protitelo, specifično za ta tip celic . Vsaka od teh protiteles oddaja drugačno barvo svetlobe . Stroj vznemirja rešitve za vdreti v posameznih kapljic in uporablja senzor za zaznavanje barve vsakega kapljic . Stroj razvrsti celice , ki izvira iz barve in jih deli glede na tip proteina , ki jih vsebujejo . Metodologija miš omogoča raziskovalcem , da razvrstite in količinsko celice v interesu svojih raziskovalnih vprašanj .
Imunske elektronska mikroskopija

Normal elektronska mikroskopija znanstvenikom omogoča, da preuči strukturo celice veliča do 1 milijon krat. Imuno - elektronska mikroskopija uporablja lastnosti protiteles , ki vežejo antigen za vizualizacijo zlasti beljakovin v oddelkih zelo tankih tkiva. Prvič , protitelesa, s pritrjenimi zlatih delcev pustimo, da se veže na antigen, ki nas zanima. Elektronski mikroskop nato vizualizira zlate delce , kar raziskovalcem podobo , kjer jeprotein lokalizirana v celici.

Čeprav imunsko elektronsko mikroskopijo je preprosto v teoriji , je tehnično težko in zelo drago za zaposlovanje , omejevanje njena priljubljenost uporabe v številnih bioloških raziskovalnih programov.