Lizni jeukrep , s katerim se celice dobesedno razpadla , zaradi česar je njihova vsebina za razlitje za analizo. Celice , ki vsebujejo vzorec DNK , ki se izpisanih se morajo odpreti , kar nam omogoča, da pridobijo dostop do lizat alitekočina v notranjosti. To dosežemo na več načinov ,najpogostejši katerih je sonifikacijo . Sonifikacijo jepostopek, s katerim kondenzirali zvoka je uporabljeno v celicah , s čimer jim stresanje in razstavljanje njihovih intermolekularne reakcije . Druge metode za induciranje liza vključuje uvedbo virus, ki prelomi odpreti od znotraj; encimi, ki jedo zunaj na površini; in osmoza , ki vključuje dajanje celice v vodi , ki omogočatekočina znotraj njih , da bi njegova stran na zunanji strani , kjer jih je mogoče izvleči .
Membrane Removal
Dalje, lipidi okoli membrani celice je treba odstraniti . Lipidi so vrste maščob, voskov, monogliceridov , fosfolipidov in drugih naravno prisotnih molekularnih snovi, ki se uporabljajo kot strukturnih elementov na celične membrane , kar jim daje neko trdnost . To se odstranijo s spiranjem lizatcelic " v raztopino čistila , običajno obliko kromove kisline.
Protein Removal
Po lipidov so bili uspešno odstranjeni iz lizat , to je zdaj pomembno, da se odstranijo vse preostale beljakovine . To se doseže z dodajanjem , kar je znano kot proteaze . Proteaza je poseben encim zasnovan razgraditi posredovanih beljakovine . Ta ukrep se imenuje proteolize , medtemproteaze povzroča hidrolizo ( razbije ) obveznic , ki imajo aminokisline skupaj . Aminokisline tvorijo beljakovine in brez njihove konfiguracije ,beljakovine razgrajuje .
Obarjanje
je končno čas, da si ogledate čisto DNK . To se lahko izvede s potapljanjem lizata v ledeno mrzlo alkohola , običajno etanola . Ker je DNA netopen v alkoholu , bo zlepljajo . Ko se zmes mešamo s kovinsko žlico , boDNA vidno ovije okoli kovine , ki spominja belo bombaž . To je znano kot precipitiranje z DNK, znan kot oborino DNA .
Izopropanol
Poleg etanola , izopropanola tudi občasno uporablja se izvleček oborino DNA . Na pozitivni strani je bolj učinkovit kot etanol , prinaša višjo koncentracijo DNK , če se uporablja . Vendar pa je tudi precej manj hlapna in zahteva več časa , da se posuši . Treba je opozoriti tudi, daDNK ne more držati , kot tudi z žlico ali cev pri uporabi izopropanol .
Zdravje in Bolezni © https://sl.265health.com