Alkalne lize Teorija

Znanstveniki uporabite alkalno lizo za pridobivanje plazmidne DNA iz bakterij za uporabo pri genetskih poskusov. Plazmidi so majhne krožne molekule DNA , ki vsebujejo majhen del genetskega zapisa za študij . Zato alkalne lize

alkalne lize protokol je sestavljen iz niza dodamo raztopini bakterijske pelete , ki vsebuje plazmidno DNA . Večja alkalnost raztopine povzroči celice , da se razpoči . Ta metoda ekstrakcije ščiti plazmidno DNA , medtem ko uničuje genomske DNA in denaturacijo celičnih proteinov za zagotavljanje znanstvenika z relativno čistega vzorca.
SDS in NaOH

alkalne opisuje dve glavni kemikalij , ki se uporabljajo , da povzroči lizo posameznih celic . Natrijev dodecil ( lavril ) sulfat ( SDS ) jedetergent , ki destabilizacijo celico z ustvarjanjem luknje v celično membrano . Natrijev hidroksid (NaOH ), dodaja, pri razgradnji celične stene povzročajo celice razpadati in sprostitev njegov genski material v raztopino .
Zakaj plazmidne DNA preživi

dodatna lastnost NaOH v alkalni razkrojnem protokola, da se motijo ​​vodikove vezi med baznih parov DNA . Ta denatures genomske DNA in plazmidno DNA na posameznih sklopih. Dodajanje kalijevega acetata v raztopino nevtralizira bazičnosti inmajhne plazmidne DNA je lahko ponovno naravo in raztopimo v raztopini . Genomske DNA je prevelika, da bi ponovno narave po vsej dolžini. To in denaturirani proteini oborine med centrifugiranjem zapusti plazmidne DNA v raztopini .