Kloramfenikol Plate Priprava

Kloramfenikol je antibiotikširokega spektra , ki uničuje bakterijske mikrobov, ki jih ovira njihovo sposobnost , da posnema . Ta antibiotik je bil prvotno razvit za boj proti okužbam pri ljudeh , vendar po Drug.com , uporablja pa se šele zdaj , kot v tej publikaciji , kot zadnja možnost, ko so druga zdravila, ki ne deluje zaradi resnih stranskih učinkov , kot so aplastične anemije , hipoplastične anemija, trombocitopenija in granulocitopenija . Kloramfenikol je uporabna v raziskovalnem laboratoriju za poskuse za molekularno biologijo . Ko je kloramfenikol pripravimo na ploščo , se lahko uporablja za odkrivanje bakterijske koncentracijo ali da izolira nekaterimi sevi bakterij za nadaljnje poskuse . Tisto, kar potrebujete
destilirano vodo,
kloramfenikol
1,0 odstotka triptona jezik 0,5 odstotka ekstrakta kvasovk
1,0 -odstotno raztopino natrijevega klorida (NaCl ), pH 7,0
95 odstotkov etanola
Agar
2 - litrska bučka
magnetno mešalo plate
Srednje velika magnetna mešalom
lateksa ali nitrilne
Laboratorij lestvica
Avtoklav
30 sterilnih 10 cm krožnike
Blue označevanje pisalo
parafilm
aluminijasto folijo
Autoclave trakom
Proste Prikaži več navodil

1

nadenite iz lateksa ali nitrilne rokavice za pripravo LB juho . LB brozge jeskupna kratica za Lysogeny brozge ali Luria brozge , in je , kot se uporablja kot rastni mediji, za kultiviranje bakterij . To je mogoče narediti iz nič v laboratoriju , ali pa bi prihranili čas je mogoče kupiti od vseh biologije dobavitelja molekularno parka .
2

postavite list papirja tehtanju na tehtnico . S pritiskom na tipko nastavitev na ničlo v obsegu, tako da semase papirja , ki niso vključeni v končno težo . Dodaj majhne količine triptona naenkrat, dokler nepridete do 10 g . Nato zložite tehtati papir v polletju z triptona v centru . Pick up tehtati papir in previdno uporabljati zložen papir kot lijak za dodajanje Tripton do 2 L bučko . Sledite postopku za tehtanje 5 g kvasnega ekstrakta, 10 g NaCl in 15 g agarja .
3

Spusti palčko v bučko in bučko osredotočeno na magnetno mešalno ploščo. Dodajte dovolj destilirane vode, da bo rešitev do 1 litra .
4

Obrnite premešajte ploščo naprej, in gledal palčko . Plošča je treba določiti na pravo hitrost , dastir bar , da se premaknete v zmernem tempu ne bo obstal na straneh bučke. Po potrebi prilagodite nastavitve . Pustimo, da se rešitev , da bi sedel na plošči, dokler se ne raztopi vsi reagenti .
5

Izklopite premešajte ploščo , in se raztezajo 3- palčni kvadratni kos parafilm v vrhu bučke , da kritje in bučko zaščititi pred vsemi onesnaževalcev ali razlilo . Nato pokrivajo parafilm s kosom aluminijaste folije in dodamo kos označevanje avtoklava trak na vrhu folijo .
6

postavimo raztopino v avtoklavu na tekočem ciklu za 20 minut pri 15 psi do ga sterilizirajte .
7

bučko odstranimo iz avtoklava . To bo zelo vroče . Pustite, da se raztopina ohladi na okoli 55 - stopinj Celzija , tako da pustite, da sedi pri sobni temperaturi , ali jih dajanje bučko v 65 stopinj Celzija vodni kopeli .
8

Spray in obrišite delo površini z 95 -odstotnim etanolom, da se prepreči kontaminacija. Prav tako jedobra ideja, da spremenite svoje rokavice pred ravnanjem plošče .
9

Markstran in pokrov vsako ploščo z vertikalnim modrim trakom uporabo peresnika CE. To kaže na plošče imajo LB brozge in kloramfenikol .
10

Dodaj dovolj kloramfenikol antibiotika raztopine tako, da koncentracija doseže želeno količino , glede na bakterije, ki jih bo sodelovanje z . Skupna končna koncentracija 100ug/ml . Pri tej koncentraciji , dodamo 1 ml kloramfenikol parka (na 25mg/ml ). Bučko vrtite s krožnimi gibi , ali ga postavite nazaj na magnet mešalne plošče za 1 do 2 minuti , da se prepričajte, da je dobro premešano .
11

usta bučke obrišite dol z etanolom , in nato prelijemo raztopino v ploščah, dokler so napolnjene do polovice z raztopino . Naj plošče strdi , zajema vsako ploščo s pokrovom in jih shranite na glavo obrnjen na 4 stopinj Celzija , da bi preprečili izsušitev.