Zakaj postavite rentgenski film na vrh najlonske membrane v pladnju?

V okviru tehnik molekularne biologije, kot sta Southern blotting ali Northern blotting, rentgenski filmi običajno niso postavljeni na najlonske membrane znotraj pladnjev. Namesto tega se najlonske membrane, ki vsebujejo elektroforetično ločene nukleinske kisline (DNA ali RNA), pogosto prenesejo na trdne nosilce, kot je Whatman papir, čemur sledi pečenje ali UV zamreženje, da se nukleinske kisline trajno imobilizirajo na membranah.

Rentgenski filmi so nameščeni poleg teh najlonskih membran ali v tesnem stiku z njimi, običajno zaviti ločeno v plastično folijo, ko se izvaja avtoradiografija. Avtoradiografija omogoča detekcijo in vizualizacijo radioaktivno označenih nukleinskih kislin na membranah tako, da zraven njih v kasetah (zaprti svetlobno odporni nosilci, ki držijo film tesno ob membrani) položijo rentgenske filme.

Ko radioaktivni material razpade, sprosti energijo v obliki fotonov ali elektronov, ki medsebojno delujejo s kristali srebrovega halogenida na rentgenskem filmu. To vodi do razvoja temnih madežev ali pasov na rentgenskem filmu po obdelavi, ki ustrezajo položajem radioaktivno označenih nukleinskih kislin na membrani.

Zato rentgenski film ni nameščen neposredno na vrh najlonske membrane, ampak se uporablja ločeno za zajemanje sevanja, ki ga oddajajo radioaktivne sonde, hibridizirane z nukleinskimi kislinami na membrani.