Kako narediti LB agar plošče

Agar ježelatinasta snov , izdelana iz rdečih alg in se uporabljajo za različne namene . Ena od njene skupne uporabe je kot medij za kultiviranje bakterij . LB agar agar je hranilna snov, ki je povezano z lysogeny brozge (LB ). To jeobičajno potekala fallacy , da LB stoji za Luria - Bertani . Vendar pa je njen izumitelj, Giuseppe Bertani , navaja v svojem prispevku " Lysogeny na sredi dvajsetega stoletja : P1 , P2 in z drugimi eksperimentalnimi sistemi ", ki so bile začetnice vedno skušala stati lysogeny brozge , ni njegovo ime in njegovega coresearcher , Salvador Luria . LB agar je vsestranski in dokaj enostavno narediti . Tisto, kar potrebujete
za 1 l končnega medija :
merilu in ki tehtajo dokumentih ali pladnjih
1 -L jeklenki
1 L z destilirano ali deionizirano vodo
2 -L erlenmajerico
10 g tripton
5 g kvasnega ekstrakta
5 g noniodized jedilna sol
15 g agar
aluminijasto folijo
nepremočljive rokavice brez prstov pečico
Avtoklav ali lonec
Sterilni Petri plošče
Proste Prikaži več navodil
1. Uporabite erlenmajerico , ki ima dvakrat večjo količino medija , ki jih nameravate pripraviti .

Postavite Tripton , ekstrakt kvasa in soli v erlenmajerici .
2. pozornost na pritisk avtoklava ali lonec pri sterilizaciji .

dodajte destilirano ali deionizirano vodo in gospod ali stresamo, da se raztopi večino suhe sestavine .
3

Dodajte agar in še naprej pretresemo ali premešamo . Vse agar ne bodo razpadli , vendar je pomembno , da boste dobili največ od njega v raztopino . Izogibajte velike kepe , raztopljene agar naselijo v dnu posode.
4

zatesnite odprtino bučke s folijo.
5

Bučka se postavi v avtoklavu - varno embalažo.
6

nalijte približno 1 cm vode v posodo .
7

Postavite posodo in bučko v avtoklavu . Nastavitev avtoklavu tekočem ciklu in sterilizacijo za vsaj 20 minut . Če uporabljate lonec za sterilizacijo , pojdite na korak 8. . Nasprotnem primeru preskočite na korak 10. .
8

Če uporabljate lonec , damo majhno količino vode na štedilnik in bučko postavimo v vodo . Ne poskušajte sterilizirati več kot 250 ml v času, z uporabo te metode .
9

Prinesite lonec na okoli 20 psi in sterilizacijo za približno 30 minut.
10

bučko odstranimo iz avtoklava ali lonec , pri čemer pazimo , kotbučka bo precej vroče.
11

bučko vrtimo, nežno , ko je sterilizacija končana . To bo distribuirati agar bolj enakomerno po vsej vaši rešitvi.
12

bučko postavite na ustrezno podlago in pustimo, da se ohladi malo . Če ste pripravljeni 1 l ali več medija , da ga nežno mešanje vsakih 10 do 20 minut . Morda ne boste mogli povedati , da jemedij dovolj ohladi , ko lahko imajo na hrbtni strani prstov proti bučko za približno 2 sekundi, ne da bi bilo neprijetno vroča na dotik . Počakajte približno 15 do 20 minut , preden poskušate to .
13

Postavite petrijevki na ravno površino . Nežno dvigne pokrov pod kotom , tako da je večina posodo slabo pokrita . Ne dvignite pokrov naravnost ploščo .
14

Pour medij iz erlenmajerice v petrijevki , doklerjed je približno na pol poln .
15

takoj zamenjajte pokrov , premaknite ploščo na stran in se premakniti nanaslednjo , dokler niso zapolnjena vse želene plošče . Plošče se bo zaključila svojo strjevanje v približno 30 minutah .
16

postavimo petrijevke v sterilno vrečko , v kateri so prispeli ali druga primerna , sterilno posodo , če jih ne Inokulacijsko takoj. Zapremo posodo za ohranjanje vlage . Označimo plošče po želji . Če ste shranjevanje krožnike , jih je treba hraniti pri temperaturi približno 39 do 40 stopinj F.
jezik