Perfuzijo tehnika

tehnika perfuzijo omogoča hiter in enoten fiksacijo na vseh posameznih celic, ki so prisotne v tkivih . 4 odstotke paraformaldehida utrjevanje prehaja preko vaskularnega sistema , da dobimo tkivo interesa . Glavni tarčno mesto za dajanje zdravila v določenega organa lahko identificiramo s pomočjo te tehnike . Perfuzijo je pomagal tudi znanstvenike razumeti strukturno in funkcionalno organizacijo človeških možganov . Tisto, kar potrebujete
živali ( podgane in opice )
Perfuzijska črpalke , čašo
Fixative ( 4 odstotke maldehid )
brizgalke igle
namakanje kapljično iz
škarje Neomejeno skalpelom
klešče Neomejeno 0,9 odstotka slana
Ice box
Proste Prikaži več navodil

1

Pripravite svež 4 -odstotno paraformaldehida z mešanjem 40 g paraformaldehida v 800 ml vode . Raztopino segrejemo do 60 ° C ob mešanju . Zanimiverešitev za 4. C. pH uravnamo na 9,5 s pomočjo pH metra . Za prilagoditev pH , dodajte led-ocetno kislino, da dosežemo želeni pH:
2

Nastavite perfuzijsko črpalko . Priložiti vse dele steklenih in perfuzijsko iglo . Run 100 ml vode in preko cevi perfuzijski črpalke, da odstranimo vse ostanke iz steklenih delov . Postavite čašo fiksirja v polje ledu .
3

Odprite konec perfuzijsko cevko in ga postavite v fiksiranje čašo. Merilo volumen raztopine po velikosti živali . Sedaj nastavite ventil perfuzija črpalke za počasi in enakomerno drip . Zaprite ventil. Izpolnite aparat perfuzijsko s 0,9 odstotka (masa /volumen ) solno raztopino .
4

Vzpostaviti kirurški instrumenti bližini operacijski mizi . Dati injekcijo anestezije živali glede na njeno telesno težo ( ketamin 0,5 mg /kg ) . Postavite žival na operacijski mizi z njegovim hrbtom navzdol .
5

narediti rez s skalpelom , vzdolž prepone . Z velikimi škarjami , topi obrnjena navzdol , prestregla veznega tkiva na dnu prepone . Izpostavili srce . Držite bitje srca s kleščami, v levega prekata vstaviti iglo .
6

odpreti ventil perfuzije črpalke omogoča pretok 0,9 -odstotno raztopino kuhinjske soli . Prepričajte se, darešitev, ki je prosto teče inživali je živ . Srce živali je treba nenehno bije . Ko sekri nadomesti s fiziološko raztopino , spremenite rešitev za 4 odstotke paraformaldehidom .
7

Stop perfuzijo in seciral tkivo interesa . Imejte tkivo v istem sredstvu pri 4 ° C.
jezik