Protokol transfekciji GFP

Uporaba zeleni fluorescentni protein revolucijo molekularne in celične biologije , je dovoljeno raziskovalci vizualizirati celice in proteinov na načine, nikoli prej je to mogoče. Njen vpliv na znanstvene raziskave je bila tako globoka , da je v letu 2008 Osamu Shimomura prejel Nobelovo nagrado za kemijo za odkritje in izolacijo GFP fluorescentne meduze . Definicije

genzaporedje deoksiribonukleinske kisline v celicah , ki je odgovoren za proizvodnjo določenega proteina . Plazmid jeločen del DNA, ki vsebuje gen, ki nas zanima , kot je GFP . Transfekcija jemetoda za uvajanje plazmida v celice .
Metode

Transfekcija praviloma vključuje mešanje plazmida DNA, ki vsebuje gen, kot je GFP z lipidi ali soli . Celice so izpostavljeni tej raztopini , ki ustvarja luknje v celično membrano , ki omogoča plazmida v celico, kjer jegen lahko izrazi kot beljakovin . Komercialni transfekciji kompleti so na voljo, ali reagenti se lahko izvede v laboratoriju . Izbira metode transfekciji je odvisna od vrste celic in plazmidov se uporablja. GFP je vizualizira in spremljati z opremo , ki zazna fluorescenco.
Uporabe

dobre kmetijske prakse je običajno vezana na beljakovino interesa za transfekciji . Nobelov odbor je izpostavil sledenje " poškodbe živcev celic tekom Alzheimerjevi bolezni " in " kako se proizvaja inzulina beta celic ustvarili v trebušne slinavke rastočega zarodka " kot primeri.