Genetske raziskave zahteva pridobivanje čistega vzorca DNK iz celic. Osnovni protokol začne s prekinitvijo in odstranitev zaščitne celične stene rastlin ali živali celične membrane z encima, imenovanega lizocim . Negenske celičnih komponent v obliki izločkov odstranimo s hitro predenje s centrifugo medtem DNA ostane v raztopini . DNA nato oborimo v prisotnosti natrijevega acetata soli z etanolom . Končne centrifugalna Percipitate in peleti čisti genski material za raziskovalne namene.
Verižno reakcijo s polimerazo
Genetske raziskave potrebna zadostna kopij določenih regijah DNA. Verižna reakcija s polimerazo , ali PCR , jemetoda za eksponentno izdelavo kopij DNA . Protokol zahteva očiščeno DNA, Taq polimerazo , baze , imenovane deoksinukleotidi in majhne verige DNK Premier določenem območju . Reakcijsko zmes damo v Bužan , instrument sposoben hitrih temperaturnih sprememb . Segrevanje zmesi na 95 stopinj Celzija ločuje dvojne vijačnice DNK , nato ohladimo na 48 stopinj , tako da lahko primerji sit , ali žarjenje , da se ujemajo z bazami . Temperatura se poviša na 72 stopinj , ko Taq polimeraza sestavi deoksinukleotide , imenovano podaljšanje , v novo kopijo DNK .
Zdi Genetska DNA zaporedja
zaporedja podatkov , kot je obarvana pasovi , ki označujejo baz DNA.
Avtomatizirano zaporedja se uporablja za določitev točnega zaporedje baz in primerjajo normalno z nenormalnim DNA . Protokol dodaja fluorescenčno označene dideoxynucleotides ali ddNTPs , da običajne PCR reakcijah , ki se naključno ustavijo podaljšanje fragmentov DNK . Izdelki so DNA fragmenti različni z eno bazo . Vsak osnovni tip ima drugo barvo . Končni produkti so naloženi na avtomatizirani zaporedij , napravo, namenjeno za ločevanje fragmentov po velikosti na polimer z uporabo električnega toka . Ko delci dosežejo polimerno končne točke ,digitalni fotoaparat posname osnovno barvo in pošilja podatke na računalnik za analizo .
Genotipizacijo in DNA prstnih odtisov
DNA prstnih odtisov se uporablja za identifikacijo človeških ostaja .
genotipiziranja jemetoda, ki primerja majhne segmente genoma iz enega v drugi organizem . Cilj je, da zazna majhne razlike v velikosti PCR fragmentov , ki izhaja iz običajnih ali naključnih baznih spremembe v DNK. Zasnova protokol začne z osnovno PCR z eno fluorescentno označenih premaz za odkrivanje na avtomatiziranih sekvencerjev . Označenih izdelkov so ločeni po velikosti in zabeleži z digitalnim fotoaparatom na računalnik za analizo . Genotipizacijio protokoli so namenjeni za forenzično identifikacijo prstnih odtisov , DNK in očetovstva ali odkrivanje genetskih nepravilnosti , ki povzročajo bolezni.
Zdravje in Bolezni © https://sl.265health.com