Kompetitivne vezave protokol

vezav jeposkus , ki določa sposobnost vezave proteinov ali kemikalije za specializirane virih beljakovin na površini celic , imenovanih receptorji . Metoda se pogosto uporablja v medicinske raziskave, temveč je tudi možnost, da se določi, katere droge vežejo na receptorje in spreminjanje receptorsko aktivnost , ki lahko posledično spremeni obnašanje celic. Cell Priprava

ponovno suspendira celice v ledeno mrzlo fosfatnim pufrom ( PBS ) . Merjenje koncentracije proteinov za potrditev enako raven beljakovin z uporabo specializiranega komercialno na voljo proteinov .
Vsebnost

Dodajanje - radioaktivnosti z oznako beljakovino je znano , da se veže na receptor , ligand , celični suspenziji ali tkiva . Dodaj tekmovalca , ki jepreizkus drog ali beljakovine v raziskavi in inkubiramo z radioaktivnimi ligand in celično suspenzijo . Je treba preučitiLestvica koncentracij testnega zdravila . Po inkubaciji , ločen vezanega in nevezanega ligand in merjenje radioaktivnosti .
Data Analysis

običajni ukrep je treba ugotoviti, polnajvišja koncentracija , ki zavira receptor sicer znan kot IC50 . Ta se izračuna tako, da narišejo koncentracij na logaritemski skali na X osi grafa , medtem koY os predstavlja odstotek zaviranja; krivulja sigmasto , ki jeS - oblike , je treba generira . IC50 je50 odstotkov inhibicije točka , inustrezna koncentracija se lahko prebere iz grafa .