Cilj:
Cilj tega poskusa je opazovati in preučevati proces prebave škroba z uporabo encimov in slediti spremembam v prisotnosti škroba skozi čas.
Materiali:
- 2 epruveti
- Vodna kopel ali grelni blok nastavljen na 37°C (telesna temperatura)
- Raztopina joda (razredčena)
- Benedictova rešitev
- Raztopina škroba (1%)
- encim amilaza v slini (v tekoči obliki)
- pH indikatorski trakovi
- Štoparica ali časovnik
- Kapalka
- Zaščitna očala
Postopek:
1. Priprava epruvete:
- Označite eno epruveto kot "Kontrola" in drugo kot "Encim".
2. Nastavitev nadzora:
- V epruveto "Kontrola" dodajte 5 ml raztopine škroba.
- Nato dodajte 5 ml vode v "Kontrolno" epruveto.
- Vsebino epruvete "Control" nežno premešajte.
3. Nastavitev encima:
- V epruveto "Encim" dodajte 5 ml raztopine škroba.
- V epruveto "Encim" dodajte 5 ml encima slinske amilaze.
- Vsebino epruvete "Encim" nežno premešajte.
4. Inkubacija:
- Epruveti "Kontrola" in "Encim" postavite v vodno kopel ali grelni blok, nastavljen na 37 °C.
- Prepričajte se, da so epruvete potopljene v vodo, da ohranite enakomerno temperaturo.
5. Časovni intervali:
- Epruvete pustite v vodni kopeli za določene časovne intervale:0 minut (začetno stanje), 5 minut, 10 minut in 15 minut.
6. Testiranje škroba:
- V vsakem časovnem intervalu odstranite epruveti "Encim" in "Control" iz vodne kopeli.
- V vsako epruveto dodajte 2-3 kapljice razredčene raztopine joda.
- Opazujte barvne spremembe v obeh epruvetah.
- Jod v prisotnosti škroba postane modro-črn.
7. Testiranje glukoze:
- V vsakem časovnem intervalu odstranite epruveti "Encim" in "Control" iz vodne kopeli.
- V vsako epruveto dodajte 5 kapljic Benedictove raztopine.
- Epruvete postavite v vrelo vodno kopel za 2-3 minute.
- Opazujte barvne spremembe v obeh epruvetah.
- Benedictova raztopina postane zelena, rumena, oranžna ali rdeča v prisotnosti naraščajočih koncentracij glukoze.
8. Spremljanje pH:
- V vsakem časovnem intervalu odstranite epruveti "Encim" in "Control" iz vodne kopeli.
- Uporabite pH indikatorski trak za merjenje pH raztopin v vsaki epruveti.
9. Opomba Opombe:
- Zabeležite opazovanja in spremembe barv v obeh epruvetah v vsakem časovnem intervalu.
10. Ponovite poskus:
- Ponovite poskus, da dobite več podatkovnih točk in zagotovite doslednost rezultatov.
Pričakovani rezultati:
- V "Kontrolni" epruveti bo raztopina joda ves čas poskusa ostala modro-črna, kar kaže na prisotnost škroba. Benedictova raztopina bo ostala modra v epruveti "Control", kar kaže na odsotnost glukoze. pH v "Kontrolni" epruveti mora ostati razmeroma stabilen.
- V epruveti "Encim" bo raztopina joda sčasoma postopoma izgubila svojo modro-črno barvo, kar kaže na razgradnjo škroba s pomočjo encima amilaze iz sline. Sčasoma bo raztopina postala svetlejša ali pa se bo obarvala svetlejše. Benedictova raztopina bo spremenila barvo v zeleno, rumeno, oranžno ali rdečo, kar kaže na prisotnost glukoze, ki nastane pri prebavi škroba. pH v epruveti "Encim" se lahko rahlo zniža zaradi nastajanja kislin med prebavo.
Sklep:
Poskus prikazuje proces prebave škroba z encimom slinske amilaze. Z opazovanjem barvnih sprememb v prisotnosti joda in Benedictove raztopine lahko sledimo razpadu škroba v glukozo. Spremljanje sprememb pH zagotavlja dodatne vpoglede v kemične spremembe, ki se dogajajo med prebavo. Ta poskus poudarja temeljna načela interakcij encim-substrat in vlogo encimov pri razgradnji kompleksnih ogljikovih hidratov v enostavnejše sladkorje.
Zdravje in Bolezni © https://sl.265health.com