PBMC protokol

krioprezerviranih perifernih krvnih enojedrnih celicah ( PBMC ) sopogost vir osebkov za raziskave , ki vključuje imunoterapije in odzive na cepiv. Medtem ko so nekateri protokoli omejena na izolacijo in zasegu fazah procesa , drugi pa vključuje postopke za odmrzovanje . Izolacija Postopek in zamrzovanja Postopek

komercialna Spojina spodbujati ločevanje je postavljen v vsako centrifugirko 50 ml in cevi centrifugiramo trideset sekund . Kape krvnih cevi so poškropiti z alkoholom pred odprtjem , potem je - antikoagulantni obdelano polno kri nato prenese preko pipete v centrifugirkah . Plazmi sloj krvi posrka s pipeto .
Zamrzovanja

celic iz prejšnje stopnje bo nato centrifugirali s pufrom trikrat . Po števila celic , bo osebkov centrifugirali nato suspendiramo v medij za zamrzovanje . Osebki v zamrzovalni medij so naslednji razdeljena med kriofiol v enem ml zneskih . Viale so shranjene nočitev v jezik

-70 ° C zamrzovalniku in se preselil v dolgoročno shranjevanje v tekočem dušikunaslednji dan .
Safe Odtaljevanje

kriofiol prenesejo iz tekočega dušika do 37 ° C vodno kopel in vzorec se odmrzne 01:59 minut . Toplo prevoznih sredstvih se doda vsaki viali . Razredčena suspenzije celic centrifugiramo sedem minut . Število in preživetje celic se preveri , če potrebujete celice s koncentracijo, se osebki centrifugirajo še sedem minut. Vzorec je razredčen za delovne raztopine in počivati ​​12-18 ur pred začetkom izpita v določenem protokolu .